一、试剂介绍
MTSEA-DBCO 是一个非常精巧且功能强大的 “双功能化化学探针” ,它将两种高效的生物正交化学策略——硫醇反应性与无铜点击化学——融合于一体,专用于在蛋白质或核酸上引入可点击的官能团。
1、MTSEA:这是 Methanethiosulfonate 的缩写,完整名称是甲基硫代磺酸盐。其核心是一个 -SO₂-S-CH₃ 官能团。
关键反应: MTSEA是一种经典的硫醇特异性烷基化试剂。它与游离硫醇(如半胱氨酸残基上的-SH)发生亲核取代反应,生成一个混合二硫键,同时释放甲基亚磺酸。生成的产物是 蛋白质/分子-S-S-CH₂-CH₂-NH₂(或进一步的功能化形式)。
产物: 在反应中,MTSEA的S-S键断裂,将其乙胺部分连接到目标硫醇上,形成一个 “延伸的”硫醚键,同时末端留下一个氨基(在MTSEA中)或其他功能基团(在衍生物中)。
2、DBCO:二苯并环辛炔。
关键反应: 一种应变促进的环炔,能与叠氮化物在生理条件下发生快速、特异、无需铜催化剂的环加成反应(SPAAC)。这是目前最主流的无铜点击化学之一。
因此,MTSEA-DBCO的结构是:一个硫醇反应性的甲基硫代磺酸酯基团 - 一个连接臂(通常是短烷基链) - 一个无铜点击化学手柄(DBCO)。
主要应用领域
蛋白质的定点功能化:
这是其最核心的应用。通过基因工程在蛋白质的特定位点引入一个半胱氨酸,然后用MTSEA-DBCO进行特异性标记,将该蛋白质“装上”DBCO手柄。
随后,可以“点击”上任何叠氮功能分子(荧光、生物素、PEG、另一个蛋白质),实现均一、定点、多功能的蛋白质修饰。这对于制备均质抗体-药物偶联物、荧光标记蛋白等至关重要。
活细胞表面工程与成像:
利用MTSEA-DBCO标记细胞表面天然的或工程化引入的半胱氨酸。
然后,加入叠氮荧光染料,在活细胞表面进行点击反应,实现细胞膜蛋白的可视化、追踪或功能调控。
构建DNA-蛋白质偶联物:
先将MTSEA-DBCO连接到硫醇化的DNA上,得到DBCO-DNA。
再将DBCO-DNA与叠氮化的蛋白质点击,用于生物传感、纳米结构组装或蛋白质检测。
总结
MTSEA-DBCO 是一个强大的“硫醇-点击”双功能化学工具。 它完美地解决了如何将点击化学手柄(DBCO)特异、高效地安装到含硫醇生物分子上这一关键问题。
它的核心价值在于其“两步法”策略提供的巨大灵活性:先通过高特异性的硫醇化学实现精准定位安装,再通过高效、生物友好的无铜点击化学实现模块化功能引入。
二、试剂属性
中文名称:甲基硫代磺酸盐-二苯并环辛炔
英文名称:MTSEA-DBCO,Mtsea-dbco
分子式:C22H24N2O3S2
分子量:428.6 g/mol
纯度:≥95%
外观:固体
品牌:陕西新研博美生物科技有限公司
溶解性:溶于部分有机溶剂以及水
储存条件:-20℃以下冰冻、干燥避光保存,避免反复冻融
规格:1mg,5mg,10mg
结构式:
三、相关试剂
Cyanine 3 TSA,Sulfo-Cyanine3 tyramide
Cy3-a-Bungarotoxin
Cy5-a-Bungarotoxin
Cyanine 7 Tyramide Conjugates
Cyanine3 Amidite
Cy5 Bis carboxylic acid
Cy3 Bis carboxylic acid
Cyanine5-PEG5-azide
cy5-Glutamine,CY5-L-Glutamine,CY5-glutamine
Folic Acid/Folate-PEG-CY5
triSulfo-Cy5.5 amine,triSulfo-Cyanine5.5 amine
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该试剂只用于科研实验,不能用于人体。