型号推荐：TW-XC1，天蔚环境，专业仪器仪表】松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）是引发松树萎蔫病的毁灭性病原，其快速、精准检测对林业病害防控至关重要。基于PCR技术的检测仪通过特异性扩增松材线虫DNA片段，可实现高灵敏度、高特异性的现场或实验室鉴定。

一、技术原理：PCR扩增松材线虫特异性DNA

靶标基因选择

针对松材线虫高度保守的基因序列（如18S rRNA、ITS或COI基因）设计引物，确保仅扩增目标DNA，避免其他线虫或宿主植物干扰。

示例：常用引物对如Bx-F/Bx-R，可特异性结合松材线虫ITS区域，扩增产物长度约200-300bp。

PCR反应体系

核心组分：Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、特异性引物、模板DNA（样本提取液）。

反应条件：

预变性：95℃3-5分钟（激活酶并解开DNA双链）。

循环扩增：95℃30秒（变性）→55-60℃30秒（退火）→72℃30-60秒（延伸），重复30-40个循环。

终延伸：72℃5-10分钟（确保产物完整。

结果判定

电泳检测：扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离，紫外灯下观察目标条带（阳性样本显示特异性亮带）。

荧光定量PCR（qPCR）：通过SYBR Green或TaqMan探针实时监测荧光信号，实现定量分析（Ct值越低，目标DNA含量越高）。

等温扩增技术：如LAMP（环介导等温扩增），无需热循环仪，60-65℃下30-60分钟完成扩增，适合现场快速检测。

二、设备功能特点：精准、高效、便携

高灵敏度

可检测低至1-10条线虫/g样本中的DNA，甚至能从早期感染的松树组织中检出微量病原。

对比传统方法：相比形态学鉴定（需显微镜观察活体线虫）或培养法（耗时2-4周），PCR检测灵敏度提升100倍以上。

强特异性

引物设计经过严格生物信息学验证，避免与非目标线虫交叉反应。

防污染设计：配备UV消毒模块和独立反应舱，防止气溶胶交叉污染。

快速检测

实验室型设备：从样本处理到结果输出仅需2-4小时（含DNA提取时间）。

便携式设备：集成核酸提取与PCR扩增功能，1小时内完成检测，支持野外实时鉴定。

智能化操作

触摸屏界面引导用户完成实验流程，自动分析电泳图或荧光曲线并生成报告。

云平台连接：数据可上传至林业病害监测系统，实现区域疫情动态追踪。

三、应用场景：从实验室到林间地头

林业检疫与贸易监管

对进口木材、木质包装材料进行快速筛查，防止松材线虫跨境传播。

案例：某港口检疫部门使用便携式PCR仪，15分钟内完成一批进口松木样本检测，拦截3批次阳性货物。

疫情监测与早期预警

定期采集松树样本（如枝干、树皮），通过PCR检测潜伏期感染，提前1-2年预警疫情爆发。

数据驱动防控：结合GIS技术绘制疫情分布热力图，指导精准伐除病树。

科研与育种研究

筛选抗病松树品种：通过PCR检测接种线虫后的幼苗，评估抗性基因表达水平。

线虫种群动态研究：分析不同季节、海拔样本中线虫DNA载量，揭示传播规律。

现场应急处置

疫情发生时，快速划定疫区范围：无人机采集疑似病树样本，地面检测车即时PCR分析，48小时内完成万亩林区筛查。